Nutrace utical Field: Methoden zur Unterscheidung wahrer Liposomen von Pseudo liposomen (einfache Mischungen)

Kern urteil logik: Drei wesentliche Merkmale von echten Liposomen in Lebensmittel qualität

Hierarchische Unterscheidung methoden (angepasst an Forschungs-und Entwicklungs-/Produktions szenarien für Lebensmittel, von einfach bis genau)

(I) Basic Rapid Screening (Keine komplexe Ausrüstung erforderlich, geeignet für vorläufige Werkstatt urteile/Rohstoffs creening)

1.Visuelle Beobachtung + Mikroskopie (morpho logisches vorläufiges Screening)

◦Betrieb: Eine kleine Menge Probe mit gereinigtem Wasser verdünnen, auf einen Objektträger fallen lassen und unter einem optischen Mikroskop beobachten (400-1000x); oder Färbung mit 0,1% Methylenblau (Liposomen vesikel erscheinen als hellblaue Ringe).

◦Ergebnis urteil:

▪Echte Liposomen: Das System ist eine gleichmäßige durchscheinende Emulsion ohne offen sichtliche Aus fällung mit dispergierten kugelförmigen/quasi-kugelförmigen Partikeln (Partikel größe 50-1000nm);

▪Pseudo liposomen: Das System ist anfällig für Schichtung und Niederschlag, ohne feste Morphologie, nur sichtbare Nährstoff partikel oder Phospho lipid floccules.

1.Zentrifugations-Trenn prüfung (EE-Vorab-Screening)

◦Operation: Nehmen Sie 1ml Probe, zentrifugieren Sie 10 Minuten lang bei 10000 U/min, sammeln Sie den Überstand und bestimmen Sie die Konzentration der Nährstoff bestandteile im Überstand mithilfe von UV-VIS oder HPLC.

◦Ergebnis urteil:

▪Echte Liposomen: Vesikel sind nicht leicht zu brechen, und die Konzentration der freien Inhaltsstoffe im Überstand ist gering (hohe EE);

▪Pseudo liposomen: Nährstoff bestandteile werden im Überstand leicht ausgefällt oder vollständig aufgelöst (Überstand konzentration liegt nahe der Gesamt konzentration, EE≤ 0).

1.Dialyse beutel diffusions test (Verifikation des Ver kapselung effekts)

◦Betrieb: Laden Sie die Probe in einen Dialyse beutel (MWCO = 10-50kDa, größer als Moleküle von Nährstoff bestandteilen, aber kleiner als die Partikel größe von Liposomen) und dialysieren Sie sie in einem großen Puffer volumen (Simulation der Körper flüssigkeits umgebung). für 2-4 Stunden und detektieren Sie die Konzentration des Inhaltsstoffs im externen Dialysat.

◦Ergebnis urteil:

▪Echte Liposomen: Inhaltsstoffe sind in Vesikeln eingekapselt, die die Dialyse membran nicht passieren können, und die externe Flüssigkeits konzentration ist niedrig;

▪Pseudo liposomen: Inhaltsstoffe diffundieren frei und die externe Flüssigkeits konzentration liegt nahe an der Gesamt konzentration der Probe.

(II) Labor Präzise Verifizierung (Lebensmittel qualität Produkt R & D/Qualitäts kontroll bestätigung)

1.Partikel größe und Zeta-Potential analyze (strukturelle Einheitlichkeit prüfung)

◦Instrument: Dynamische Lichts treuung (DLS)

◦Schlüssel indikatoren:

▪Echte Liposomen: Gleichmäßige Partikel größen verteilung (PDI .3), Zeta potential normaler weise-20 ~-50mV (natürliche negative Ladung von Phospho lipiden), stabile Werte;

▪Pseudo liposomen: Extrem breite Partikel größen verteilung (PDI> 0,5), kein festes Zeta potential (ungleich mäßige Dispersion von Phospho lipiden und Inhaltsstoffen, große Potentials chwankungen).

1.Beobachtung der Transmission elektronen mikroskopie (TEM) (struktureller Goldstandard)

◦Operation: Färben Sie die Probe zur negativen Färbung mit Phospheit säure und beobachten Sie sie dann unter TEM (Auflösung auf nm-Ebene).

◦Ergebnis urteil:

▪Echte Liposomen: Deutlich sichtbar sind unterschied liche geschlossene Vesikel, die von Phospholipid-Doppels ch ichten gebildet werden (schwarze ringförmige Strukturen mit wässrigen Kernen);

▪Pseudo liposomen: Keine vesikuläre Struktur, nur unregelmäßige Phospholipid-Aggregate oder Partikel von Nährstoff bestandteilen (keine Doppels chicht merkmale).

◦Hinweis: Cryo-TEM kann für Lebensmittel proben verwendet werden, um zu vermeiden, dass Flecken rückstände die Sicherheits bewertung beeinträchtigen.

1.Bestimmung der Kapselung effizienz (EE) (quantitativer Kern indikator)

◦Prinzip: Trennen Sie freie Zutaten von eingekapselten Zutaten und berechnen Sie den Anteil der eingekapselten Zutaten an den Gesamt zutaten (EE % = (Gesamt zutaten freie Zutaten)/Gesamt zutaten × 100%).

◦Gemeinsame anpassbare Methoden in Lebensmittel qualität:

▪Gel filtration chromato graphie (Sephadex-G-50/G-100 säule): Liposomen zur Quant ifizierung von nieder molekül freien Inhaltsstoffen trennen;

▪Ultra filtration zentr ifugation: Bewahren Sie Liposomen mit Ultra filtration membranen, damit freie Inhaltsstoffe zum Nachweis durch gelassen werden können;

▪HPLC-Methode: Spuren wirkstoffe in Lebensmitteln (z. B. Polyphenole, Vitamine) genau quantifizieren.

◦Ergebnis urteil: EE ≥ 20% (für wasser lösliche Inhaltsstoffe wie Vitamin C) oder ≥ 30% (für fettlösliche Inhaltsstoffe wie DHA) zeigen echte Liposomen an; EE % zeigt ein einfaches Mischsystem an.

1.Differential-Scan-Kalorimetrie (DSC) (Phospholipid-Phasen übergangs prüfung)

◦Prinzip: Die Wechsel wirkung zwischen Nährstoff bestandteilen und Phospholipid-Doppels ch ichten in echten Liposomen verändert die charakter is tische Phasen übergangs temperatur (Tc) von Phospho lipiden; Das Tc von Phospho lipiden in einfachen Mischungen stimmt mit reinen Phospho lipiden überein.

◦Ergebnis urteil:

▪Echte Liposomen: Verbreiter ung der Phasen übergangs spitzen und Tc-Verschiebung (z. B. nimmt Tc nach der Einbettung von Vitamin E ab);

▪Pseudo liposomen: Der Phasen übergangs peak ist identisch mit reinen Phospho lipiden (keine Wechsel wirkung zwischen Inhaltsstoff und Phospho lipid).

1.In-vitro-Release-Kurve Bestimmung (Überprüfung der Absorptions effizienz)

◦Betrieb: Verwenden Sie die Dialyse beutel methode, um die gastro intestinale Umgebung zu simulieren (pH = 1,2 Salzsäure lösung → pH = 7,4 Puffer) und bestimmen Sie die Freisetzung menge des Inhaltsstoffs zu verschiedenen Zeitpunkten.

◦Ergebnis urteil:

▪Echte Liposomen: Sanfte Freisetzung kurve, kumulative Freisetzung srate 48 Stunden (Schutz der anhaltenden Freisetzung, Verringerung der Magensäure zerstörung);

▪Pseudo liposomen: Kumulative Freisetzung srate> 90% innerhalb von 12 Stunden (schnelle Exposition, anfällig für Abbau).

(III) Fort geschrittene Verifizierung (Szenarien für Lebensmittel/Nahrungs ergänzungs mittel mit hoher Nachfrage)

1.Kon fokale Laser-Scan mikroskopie (CLSM) Beobachtung

◦Operation: Beschriften Sie Phospho lipide mit fluor zieren den Sonden (z. B. DiI zur Kennzeichnung von zwei Schichten) und Nährstoff bestandteilen (z. B. FITC zur Peptid markierung), beobachten Sie dann die Fluoreszenz verteilung.

◦Ergebnis urteil:

▪Echte Liposomen: Überlappung von zwei Fluoreszenz signalen (in Liposomen eingekapselte Inhaltsstoffe);

▪Pseudo liposomen: Trennung von zwei Fluoreszenz signalen (keine feste Bindung zwischen Inhaltsstoffen und Phospho lipiden).

1.Kleinwinkel-Röntgens trahl streuung (SAXS)

◦Prinzip: Phospho lipid doppels ch ichten von echten Liposomen erzeugen charakter is tische Beugung spitzen (um 2θ = 20 °), die in einfachen Gemischen fehlen.

◦Ergebnis urteil: Vorhanden sein charakter is tischer Beugung spitzen → Wahre Liposomen; Fehlen charakter is tischer Peaks → Pseudo liposomen.

Häufige Missverständnisse und wichtige Erinnerungen im Lebensmittel bereich

1.Missverständnis 1: "Emulsion = Liposomen"

Pseudo liposomen können aufgrund der Phospholipid-Aggregation auch Emulsionen bilden, haben jedoch eine breite Partikel größen verteilung (PDI> 0,5) und keine vesikuläre Struktur, die durch TEM-oder EE-Bestimmung schnell unterschieden werden kann.

2.Missverständnis 2: "Enthält Phospho lipide = Liposomen"

Der Kern der Liposomen sind "Doppels chicht vesikel", nicht nur die Zugabe von Phospho lipiden. Phospho lipide in einfachen gemischten Lebensmittels ystemen wirken nur als Emulgatoren und können Nährstoff bestandteile nicht einkapseln oder schützen.

3.Schlüssel Erinnerung: EE ist der quantitative Kern indikator

Unabhängig von der Morphologie werden Systeme mit EE grunds ätzlich als Pseudo liposomen (oder fehl geschlagene Liposomen in Lebensmittel qualität) beurteilt, die keine Verbesserung der Nährstoff zutaten durch nachhaltige Freisetzung und Bio verfügbar keit erreichen können.

4.Schnelles Erkennungs schema für Workshops zur Lebensmittel produktion

Nehmen Sie die Kombination "Zentr ifugation + UV-Detektion" an: Nach Zentr ifugation bei 10000 U/min für 10 Minuten, wenn das Verhältnis der Nährstoff konzentration im Überstand zur Gesamt konzentration <10% beträgt und das System keine Schichtung aufweist, kann es zunächst als qualifizierte Liposomen in Lebensmittel qualität beurteilt werden. es ist ein einfaches Mischsystem.

Zusammenfassung

Die Kern logik zur Unterscheidung von echten/falschen Liposomen im nutrazeutischen Bereich lautet:Quant ifizieren Sie zuerst die Ver kapselung und Schutz wirkung von Nährstoff bestandteilen durch EE, dann überprüfen Sie die vesikuläre Struktur durch Morphologie (TEM/Mikroskopie). und bestätigen Sie schließlich den praktischen Anwendungs wert durch Verarbeitung stabilität und In-vitro-Freisetzung kurven. Es eignet sich für die F & E und Qualitäts kontrolle von Nahrungs ergänzungs mitteln und funktionellen Lebensmitteln (z. B. DHA-Liposomen, probiotischen Liposomen, pflanzlichen Polyp henol liposomen). Die Kombination der "EE (HPLC-Methode) TEM-Beobachtung" wird bevorzugt, um die Genauigkeit und die Sicherheits anforderungen in Lebensmittel qualität auszug leichen.