English
français
Deutsch
Español
русский
português
Luteolin ist eine natürliche Flavon oid verbindung, und die folgenden sind einige gängige Nachweis methoden:
Die Hoch leistungs flüssigkeits chromato graphie basiert auf dem Unterschied in den Verteilungs koeffizienten verschiedener Substanzen zwischen der stationären Phase und der mobilen Phase zur Trennung. Die Probe wird in eine mobile Phase (normaler weise ein Lösungsmittel oder ein gemischtes Lösungsmittel) injiziert, die die Probe durch eine chromato graphische Säule führt, die mit einer stationären Phase (wie Kieselgel) gefüllt ist. Verschiedene Verbindungen bewegen sich mit unterschied lichen Geschwindigkeiten in der Säule, um eine Trennung zu erreichen. Schließlich wurde Luteolin unter Verwendung von UV-Vis-Detektoren nachgewiesen, da es eine bestimmte UV-Absorptions wellenlänge aufweist.
Proben vorbereitung: Pflanzen extrakte oder andere Proben, die Luteolin in geeigneten Lösungsmitteln enthalten (wie Methanol, Ethanol usw.), extrahieren und auflösen; und führen Sie Vorbehandlung schritte wie Filtration und Zentr ifugation durch, um Verunreinigungen zu entfernen.
Chromato graphische Zustands einstellung: Wählen Sie eine geeignete chromato graphische Säule (z. B. eine chromato graphische Spalte der umgekehrten Phase C18), und die mobile Phase kann ein Methanol wasser-oder Aceton itril wassersystem sein. Fügen Sie eine angemessene Menge Säure (wie Ameisensäure, Phosphorsäure) entsprechend der tatsächlichen Situation hinzu, um den Trenn effekt zu verbessern. Die Durchfluss rate liegt im Allgemeinen zwischen 0,8 und 1,5 ml/min, und die Säulen temperatur wird normaler weise bei Raum temperatur oder bei einer geeigneten konstanten Temperatur (wie 30-40 ° C) nach Bedarf eingestellt. Die Detektion wellenlänge wird im Allgemeinen auf etwa 350nm eingestellt, die maximale Absorptions wellenlänge von Luteolin.
-Injektion und Analyse: Injizieren Sie die verarbeitete Probe in die Injektion öffnung des Chromato graphen, zeichnen Sie das Chromato gramm über eine Computers oftware auf und führen Sie eine qualitative und quantitative Analyse von Luteolin auf der Grundlage der Retention szeit und der Spitzen fläche durch.
Hohe Trenn effizienz kann effektiv trennenLuteolin Massen pulverVon anderen Verunreinigungen in komplexen Proben.
Hohe Nachweis empfindlichkeit, in der Lage, niedrige Luteolin konzentrationen nachzuweisen.
Die Ergebnisse sind genau, weisen eine gute Reproduzier barkeit auf und eignen sich für die quantitative Analyse.
Nachteile:
Die Instrumente und Geräte sind teuer und erfordern profession elle Wartungs-und Betriebs fähigkeiten.
Die Analyse zeit ist relativ lang, insbesondere für die Trennung von komplexen Proben.
Kombination der Trenn fähigkeit der Flüssigkeits chromato graphie mit der hohen Empfindlichkeit und Selektivität der Massen spektrometrie zur Identifizierung. Die Probe wird zuerst durch Flüssigkeits chromato graphie getrennt und tritt dann in das Massen spektrometer ein. Das Massen spektrometer ionisiert Moleküle und misst das Masse-Ladungs-Verhältnis (m/z) von Ionen, um die Masse des Moleküls zu bestimmen, wodurch Luteolin ident ifi ziert wird. In der Zwischenzeit kann eine quantitative Analyse basierend auf der Stärke von Ionen durchgeführt werden.
Proben vorbehandlung: Ähnlich wie bei HPLC muss die Probe extrahiert und gereinigt werden, um störende Substanzen zu entfernen.
Geräte parameter einstellungen: Die Parameter einstellungen für den Flüssigkeits chromato graphie abschnitt sind im Grunde die gleichen wie bei der HPLC, bei der Auswahl der mobilen Phase muss jedoch die Kompatibilität mit der Massen spektrometrie berücksicht igt werden. Das Massen spektrometer muss Parameter wie Ionisation modus (wie Elektrospray-Ionisation ESI oder Atmosphändruck-Ionisation APCI), Scan bereich, Detektion modus (positiver Ionen-oder negativer Ionen modus) einstellen. etc. Für Luteolin können im ESI-Negativ ionen modus gute Detektion sergeb nisse erzielt werden.
Analyse und Identifizierung: Injizieren Sie die Probe in das Instrument, trennen Sie sie zuerst durch Flüssigkeits chromato graphie und erhalten Sie dann das Massen spektrum im Massen spektrometer. Durch Vergleichen mit bekannten Massen spektrometrie datenbanken von Magnolol und Kombinieren von Informationen wie Retention szeit wird das Vorhanden sein von Magnolol bestimmt und die Quant ifizierung basierend auf der Intensität der Massenspektrometrie-Peaks durchgeführt.
Es hat eine hohe Empfindlichkeit und Selektivität und kann die Struktur von Luteolin genau identifizieren.
Spuren von Luteolin in komplexen Proben können auch wirksam seinY entdeckt.
Nachteile:
Das Instrument hat hohe Kosten und einen komplexen Betrieb und erfordert profession elles Personal, um Daten zu bedienen und zu analysieren.
Die Analyse von Massen spektrometrie daten erfordert ein gewisses Maß an Fachwissen und Erfahrung.
Das konjugierte System in der Moleküls truktur von Luteolin kann bestimmte Wellenlängen bereiche von ultraviolettem sichtbarem Licht absorbieren. Nach dem Lambert-Beer-Gesetz (A = ε bc, wobei A die Absorption ist, ε das molare Absorptions vermögen ist, b die optische Weglänge ist und c die Proben konzentration ist), innerhalb eines bestimmten Konzentration bereichs ist die Absorption proportional zur Konzentration von Luteolin in der Probe. Der Gehalt an Luteolin kann durch Messung der Extinktion bestimmt werden.
Standard kurven zeichnung: Bereiten Sie eine Reihe von Standard lösungen mit unterschied lichen Konzentrationen unter Verwendung einer bekannten Konzentration von Luteolin standard vor und messen Sie die Absorption bei der maximalen Absorptions wellenlänge von Luteolin (wie 350nm). mit einem UV-sichtbaren Spektro photometer. Zeichnen Sie eine Standard kurve mit der Konzentration als x-Achse und der Absorption als y-Achse.
Proben bestimmung: Verdünnen Sie den Extrakt der Test probe angemessen, messen Sie die Absorption bei derselben Wellenlänge und berechnen Sie den Gehalt an Luteolin in der Probe basierend auf der Standard kurve.
Das Instrument ist einfach, einfach zu bedienen und kosten günstig.
Für Proben mit hohem Gehalt an Luteolin kann ein schneller Nachweis durchgeführt werden.
Nachteile:
Schlechte Selektivität und Anfälligkeit für Interferenzen durch andere Substanzen mit ähnlichen Absorptions wellenlängen in der Probe.
Kann nicht effektiv zwischen Luteolin und seinen strukturellen Analoga unterscheiden.
Legen Sie die Probe auf eine Dünnschicht platte, die mit einem Adsorbens (wie Kieselgel) beschichtet ist. und entwickeln Sie es auf der Platte unter Verwendung eines geeigneten Entwicklungs mittels (wie eines gemischten Lösungsmittels von Toluol ethylacetat Ameisensäure). Verschiedene Verbindungen haben unterschied liche Adsorption desorption fähigkeiten zwischen dem Adsorbens und dem Entwicklungs mittel und bewegen sich somit unterschied liche Abstände auf der Dünnschicht platte, um eine Trennung zu erreichen. Osmanthus-Extrakt kann qualitativ analysiert werden, indem sein Rf-Wert mit Standard proben verglichen wird, oder halb quantitativ anhand der Intensität von Flecken nach der Farbreaktion analysiert werden.
Dünnschicht platten vorbereitung oder-kauf: Sie können Ihr eigenes Dünnschicht brett aus Silikon vorbereiten oder im Handel erhältliche Dünnschicht platten erwerben.
Proben probenahme: Lösen Sie die Probe in einem geeigneten Lösungsmittel auf und verwenden Sie eine Mikros pritze oder Kapillare, um die Probe auf der Startlinie der Dünnschicht platte zu erkennen.
Entfaltung und Farbent wicklung: Legen Sie die Dünnschicht platte in einen sich entwickelnden Zylinder, der ein Entwicklungs mittel enthält, und entfalten Sie sie. Nachdem die Vorderkante des Entwicklungs mittels zu einem bestimmten Abstand aufgestiegen ist, entfernen Sie die Dünnschicht platte und trocknen Sie sie an der Luft. Dann werden geeignete Farb reagenzien (wie Aluminium tri chlorid reagenz) für die Farbent wicklung verwendet, und die Reaktion zwischen Luteolin und Aluminium tri chlorid führt zu fluor zieren den Flecken unter UV-Licht. Die Spot position und Intensität werden unter UV-Licht beobachtet.
Die Ausrüstung ist einfach, die Bedienung ist schnell und die Kosten sind gering.
Mehrere Proben können vorläufig gescreent und gleichzeitig getrennt werden.
Nachteile:
Ungenaue Quant ifizierung, haupt sächlich für die qualitative oder halb quantitative Analyse verwendet.
Der Trenn effekt ist relativ schlecht und es ist möglicher weise nicht möglich, Luteolin und andere Komponenten vollständig von komplexen Proben zu trennen.
